Determinación de la sideremia

FUNDAMENTO: Esta técnica se basa en la determinación de la cantidad de hierro con el espectofotómetro y aplicando la fórmula

MATERIAL
Centrífuga
Tubos de ensayo y gradilla
Micropipeta y puntas de micropipeta
Espectrofotómetro y cubetas de espectrofotómetro

REACTIVOS: R1 tampón, R2 reductor, R3 color, Iron Cal (patrón).

MUESTRA: Sangre venosa anticoagulada

PROCEDIMIENTO
- Enfrentamos dos tubos en la centrífuga. Uno con sangre y otro con agua con la misma cantidad.- Retiramos el sobrenadante (plasma) y lo colocamos en un tubo de ensayo.

- Rotulamos correctamente los tubos y preparamos la siguiente bateria de disoluciones:





- Mezclamose incubamos durante 5 minutos a 37ºC o 10 minutos a temperatura ambiente
- Rotulamos cada cubeta de igual manera que los tubos y vertemos el contenido de cada tubo en su cubeta correspondiente
- Configuramos el espectofotómetro:
Longitud de onda 540nm, volumen 100, tempertura 0, tiempo 0
- Medimos la absorbancia con el espectofotómetro y anotamos los resultados

LECTURA DE RESULTADOSNos han salido valores muy altos debido al mal estado de la sangre.
Para calcular el valor:
SIDEREMIA(ug/dl) = muestra - blanco muestra/ patrón x concentración del patrón