Dterminación de un Du

Fundamento:
El Du es un antígeno D débil que no se pone de manifiesto en las pruebas normales de determinación del Rh. Por ello debemos sensivilizar previamente los hematíes problema con un suero que contiene anticuerpos anti-D, y posteriormente enfrentarlos al suero de Coombs. Si existe el antígeno Du en la superficie de los eritrocitos, se producirá la unión de los anicuerpos anti- D a sus receptores de membrana, y en la segunda fase darán lugar a la alglutinación en presencia del suero antiglobulina humana.


Material:
- Tubos de ensayo
- Centrífuga
- Pipetas Pasteur
- Gradilla
- Baño de agua
- Reloj

Muestra:
Hematíes de la sangre problema previamente lavados tres veces en solución salina y suspensión al 5%.

Reactivos:
Suero anti-D humano
Suero de Coombs
Solución salina fisiológica

Procedimiento:
- En un tubo de ensayo colocamos una gota de suero anti-D y una gota de suspensión de hematíes al 5%.
- Mezclamos suavemente e incubamos a 37 ºC durante 30-45 min.
- Después de incubar, lavamos los hematíes tres veces.
- Añadimos sobre el sedimento hemático una gota de suero de Coombs, y mezclamos .
- Centrifugamos el tubo a 1000 rpm durante 1 min.

Lectura de resultados:
Apreciamos la aparición o no de aglutinación. mediante golpes suaves en el fondo del tubo.
Para evitar los falsos  positivos debido a una sensibilización previa de los hematíes in vivo, debemos realizar una prueba de Coombs directa con los hematíes problema.