Determinación de la concentración de hemoglobina

FUNDAMENTO
Determinar la cantidad de hemoglobina en sangre, utilizando la técnica de la cianmetahemoglobina, mediante cálculos y mediante curva de calibración.

MATERIAL
Tubos de ensayo
gradilla
espectrofotómetro
micropipeta
pipeta (5ml) y prepipeta
cubetas de espectrofotómetro.
REACTIVOS: Hemoglobin 50X (Ferricianuro de potasio (0'60mmol/l), cianuro de potasio (77mmol/l) y dihidrogeno fosfato de potasio (2mmol/l)) y patrón de hemoglobina (a diferentes concentraciones).

MUESTRA
Sangre venosa anticoagulada

PROCEDIMIENTO
- Preparamos la siguiente bateria de pruebas
- Mezclamos e incubamos 3 minutos a temperatura ambiente
- Preparamos las cubetas rotulándolas igual que los tubos de ensayo
- Configuramos el espectofotómetro de la siguiente manera:
longitud de onda 540nm, volumen 100, temperatura y tiempo 0.
- leemos la absorvancia de cada cubeta en el espectofotómetro y anotamos los resultados.
- Una vez anotados los datos realizamos una curva de calibración.