Prueba de la sacarosa

FUNDAMENTO

La prueba de la sacarosa consiste en situar los hematíes problema en un medio de baja fuerza iónica como una solución de sacarosa.

MATERIAL
Pipetas Pasteur y graduadas
Una micropipeta de 100 ul y puntas de pipeta
6 tubos de centrífuga
Centrífuga y espectofotómetro
Cubetas para el espectofotómetro
Gradilla

REACTIVOS: Solución acuosa de sacarosa, sangre control,solución acuosa de amoniaco, suero fisiológico.

MUESTRA
Sangre venosa anticoagulada

PROCEDIMIENTO
- Rotulamos 3 tubos con: SF, SC y SP
- Realizamos la siguiente bateria de disoluciones:

TUBOS	SF	SC	SP
SUERO FISIOLÓGICO (ml)	1.8
SOLUCIÓN DE SACAROSA (ml)		1.8
SANGRE CONTROL (ml)		0.2
SANGRE PROBLEMA (ml)	0.2		0.2

- Agitamos suavemente los tubos y dejamos 30 minutos en reposo
- Centrifugamos 2000rpm 5 minutos
- Leemos al espectofotómetro a 540 añadiendo las siguientes cantidades en los tubos y posteriormente en las cubetas:

TUBOS	TB	TPr	TPa
Solución de amoniaco (ml)	5	5	5
Suero fisiológico (ml)	0.3
Sobrenadante SP (ml)		0.3
Sobrenadante SF (ml)			0.3

LECTURA DE RESULTADOS
tubo blanco TB : 0
tubo patrón TPr: 0.065 = 31.55%
tubo problema: 0.206 = 100%

%HEMOLISIS= A/Am x 100